變性為單股模式，利用螢光標定之核酸 探針與染色體上特定DNA片段做專一 性雜交，透過螢光顯微鏡觀察，計算出 細胞核內帶有預觀察基因的訊號數目。 過去研究指出15-20%轉移性乳癌會有 Her-2基因的放大或過度表現。這可以 使用免疫染色偵測蛋白質表現量。但當 免疫染色 HER2為2+表現時，屬於難以 斷定陰性或陽性，根據2018年ASCO/ CAP指引，建議進一步採用FISH確認， 藉此分析HER2基因的表現來評估患者 的預後效果。 4. 免疫組織化學染色法 (immunohistochemistry; IHC)（圖四）： 利用抗原和抗體間專一性的結合反 應，在抗體上結合螢光或可呈色的化學 物質，檢測細胞或組織中是否有目標抗 原的存在，並加上hematoxylin對比染 色，觀察標的物外的背景組織與細胞。 透過IHC評估的腫瘤細胞(TC) 上的各種 生物標記的表現量，如HER2、BRAS、 ROS1、ALK和PD-L1 等許多種特定分 子，其中，PD-L1表現可作為預測免疫 治療效果的生物標誌。 1. 即時定量聚合酶鏈鎖反應(RealTime PCR) assay（圖一）： 採用cobas EGFR Mutation Test v2， 利用高敏感度即時螢光偵測系統在一次 反應中同時偵測非小細胞肺癌組織檢體 中EGFR外顯子18、19、20和21中的 重要突變位點，包含G719X、Exon19 deletion、S768I、T790M、Exon20 insertion、L858R、L861Q等，作為臨床 上肺癌的用藥評估檢測。 2. 質譜陣列(MassARRAY)（圖二）： 採用All RAS 突變檢測試劑套組於 Agena Bioscience公司之MassARRAY 技術平臺進行突變測定，使用兩組 multiplex PCR反應進行擴增，利用質譜 儀直接檢測延伸產物片段的分子量，針對 大腸癌組織檢體中KRAS、NRAS與BRAF 基因進行基因型分析。以簡易流程一次完 成超過60個位點檢測，擁有高檢測靈敏 度及快速的發報告時程。 3. 螢光原位雜交法(Fluorescence in situ hybridization; FISH)（圖三）： 原位雜交技術可將組織切片檢體的DNA 圖一 即時定量聚合酶鏈鎖反應 (Real-Time PCR)assay 核酸萃取 即時定量 PCR 結果判讀 樣品製備 石蠟包埋組織切片 cobas z 480 分析儀 基因組DNA (genomic DNA) cobas® 4800 System EGFR Mutation Analysis Report ® 13 專題報導
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